进行流式实验时，样本处理至关重要，不当的样本处理会导致实验结果的失败。今天，小科来聊聊血液样本在流式实验中的处理方法。
血液样本是天然的单细胞悬液，包含红细胞、白细胞和血小板等多种成分。其中白细胞细分为有粒白细胞（中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞）和无粒白细胞（单核细胞和淋巴细胞），是机体免疫系统的关键组成部分。
目前血液样本常见的两种处理方法：一种是裂红法另一种是离心法，该如何选择呢？小科这边将两种方法给大家汇总下。
一、红细胞裂解法
在分析血液样品时，红细胞数量过多会影响细胞群体的分析，因此，我们通常会选择合适的红细胞裂解液进行裂红。在选择裂红试剂的时候我们需要注意试剂是否含固定剂。不含固定剂的试剂作用较为温和，处理后的细胞可继续培养；而含固定剂的试剂作用较为强烈，但裂红效果相对更好，且能提高实验室生物安全性。
1.优点
- 操作简单，红细胞裂解完全；
- 在裂解过程中，白细胞（如淋巴细胞、单核细胞、粒细胞等）的完整性得到较好保持，从而有利于后续的分析和检测；
- 白细胞的得率相对较高，能够满足多种实验的需求。
2.缺点
- 与密度梯度离心法相比，红细胞裂解法处理后的细胞活性可能较低；
- 红细胞裂解法对裂解时间要求较高，过长或过短均可能影响结果。
3.注意事项
- 裂解时间应在5-15分钟，具体时间按照试剂说明书要求；
- 裂红之后，溶液应当澄清透明；
- 裂红之后宜尽早进行实验，不建议将样本进行储存，容易降低细胞活性，影响实验准确性。
4.联科生物红细胞裂解液
二、密度梯度离心法
全血样本中不同类型的细胞具有不同的密度，密度梯度离心法即是根据细胞沉降系数的差异，借助淋巴细胞分离液和离心操作分离得到Peripheral Blood Mononuclear Cells（PBMC）。
1.优点
- 分离效果好，获得的细胞纯净度高；
- 较好地保持细胞活性。
2.缺点
- 实验操作繁琐；
- 离心时间长。
3.注意事项
- 操作全程应尽可能短时间内完成，以免增加死细胞数；
- 用淋巴细胞分离液分离PBMC时，离心机转速的增加和减少要均匀、平稳，使保持清晰的界面；
- 不同种属PBMC的漂浮密度不同，例如人的PBMC是在1.077 g/mL、小鼠、大鼠的则是在1.084 g/mL，这些是不能混用的。
小科语录：
- 实验重点在于快速分析白细胞总体情况，进行大量样本的初步筛查，建议使用裂红素处理；
- 如果需要获得高纯度的细胞并保持细胞活性，或者需要分离多种类型的细胞或颗粒，建议选择密度梯度离心法。
