开学学习计划,如何选择ELISA试剂盒

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小伙伴们为ELISA实验选购试剂盒时,是不是有很多问号?什么指标?什么检测限?怎样的精密度,稀释线性,特异性是优秀的?

联科生物整理了一份ELISA选择指南,助您五分钟掌握如何选到适合自己实验的试剂盒。


ELISA产品选择

根据实验物种及待检样品性质来选择

种属:人、小鼠、大鼠、鸡、牛、猴等;

检测指标:炎症因子(IL-1β、IL-6...)、肿瘤坏死因子(TNF-α...)等。

样本类型:血清、血浆、组织培养上清、组织或细胞裂解物。


确定完检测的种属及指标后,面对五花八门的试剂盒类型是不是有些摸不着头脑?

下面就来讲讲如何选择适合自己实验的试剂盒:

首先根据待测样品中检测物含量选择,

- 如果是检测正常个体表达情况,选择普通款试剂盒;

- 如果待检物含量很低,就需要选择高敏试剂盒。

其次,如果希望在实验过程中偷偷懒,比如需要检测步骤少及实验耗时短的,则可选择联科生物EasyGo!™一步法试剂盒全程仅需孵育1次,最快90分钟出结果。

例如:

我们检测正常人血清中的IgG的浓度,由于正常人血清中的IgG的浓度含量在7-16g/L,此时我们发现普通的Human IgG ELISA试剂盒标曲范围在3.13 ng/mL - 200 ng/mL,可以通过稀释样本的方式检测,选它!

Human IgG ELISA Kit检测试剂盒(酶联免疫吸附法)

链接:https://www.liankebio.com/product/human-igg-elisa-kit-6968.html


看了一下说明书,发现普通的试剂盒总共孵育时间需要3个小时,有没有更快的检测试剂盒呢?

有的有的!最新的EasyGo!™一步法试剂盒,最短孵育时间1个小时,操作步骤缩减为1步,省时省力省心,是您科研道路上的好帮手!

EasyGo!™ Human IgG One Step ELISA Kit 检测试剂盒(酶联免疫吸附法)

链接:https://www.liankebio.com/product/human-igg-one-step-elisa-kit-34576.html


说完了如何找到适合自己的试剂盒,那么该如何选择品牌呢?

这时候可以多看看以下几项:文献引用:目前引用联科生物产品的 SCI 科研论文数量已超12000篇,累计影响因子达64000+,其中包括 Science,Nature,Cell 等顶刊文献,最高影响因子 IF=54.91。

品牌历史:联科生物成立于 2002 年,是业内第一家挂牌全国中小企业股份转让系统(新三板)的企业(股票代码:831936),公司主要从事细胞生物学与免疫学相关的检测试剂研发、生产、销售和服务,是一家国家高新技术企业和省级专精特新企业。

公司资质:公司建有省级研发中心,拥有 ELISA 试剂、流式试剂和IVD 产品开发平台,目前拥有17项专利,其中国家发明专利11 项,生产体系通过 ISO9001 国际质量体系认证,产品主要服务于全国各所高校、研究所、医院和生物制药企业。

试剂盒关键技术参数:加标回收率、精密度、灵敏度等。


八大质控指标

规范严格的ELISA厂商会对产品进行质控,联科生物每个指标的ELISA产品说明书都会标注八大质控数据。我们一起来了解下这些指标的含义~

回收率

将已知的低、中、高浓度的重组蛋白掺入到待测样本中,掺入前后测到的浓度增加部分与掺入浓度之比就是回收率,以此验证检测的准确度。复杂的样本基质,如血清、血浆中可能含有干扰因子,影响准确定量目标分析物。优秀的ELISA试剂盒回收率通常在80-120%之间(视为无可计量的基质干扰),合格试剂盒在60%左右。

稀释线性

样本稀释后,最终分析物浓度应该相同,这个就是公认的实验线性。干扰因子会影响实验的线性,除非在研发环节克服这些干扰效应。我们为每个验证过的样本类型用试剂自带的稀释液进行系列稀释。结果用检测值和理论值的百分比表示,线性介于80-120%为理想结果。

精密度

在相同条件下,对被测量物(高、中、低浓度)进行多次反复测量,测得值之间的一致(符合)程度。这一特性具有重要意义:

保证一项试验中得到的结果是准确的,并且一次实验到下一次实验结果可重复;

判定两个结果相同还是不同。

通常用变异系数(coefficient of variation, CV)来表示。优秀ELISA试剂盒的酶标板内变异系数(CV)小于5%,酶标板间变异系数小于8%。

校准

每个试剂盒包含的标准品都经过高纯度蛋白的校准。联科生物标准品质量是通过与母校准品进行比较而制定。用于保证不同批次间试剂盒的一致性,所有批次的试剂盒均经过母校准品校对,不会出现结果偏差。

特异性

抗体是特异的,只与相应抗原反应。实际制备的抗体却常有非特异性反应,这是因为抗原不纯造成的。多组分抗原之间存在共同的抗原决定簇,或者两个抗原决定簇结构类似能与同一抗体结合,均可出现抗体与异源抗原的交叉反应。


联科生物ELISA试剂盒包含哪些组分

以双抗夹心法中的二步法ELISA试剂盒为例,ELISA试剂盒一般包含说明书,封板膜,预包被的酶标板,标准品,生物素被标记的检测抗体,链霉亲和素标记的HRP,显色液,终止液,检测缓冲液,标准品稀释液,洗液等十个组分。