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作者:联科生物 发布日期:2019-08-28 09:00
烈日炎炎似火烧,广大留校的大师兄们、小师妹们又双叒叕献身科研啦。小师妹:大师兄大师兄,我做ELISA标准曲线的时候,最高点吸光值总是特别高咋办哩? 大师兄:是不是标准品溶解、稀释操作错了?小师妹:我都是按照说明书来操作哒,检测也是450nm/630nm双波长检测……大师兄:如果OD值靠谱的话,那可能是显色时间太长 显色过度嘞...ELISA试剂盒说明书中的显色时间为5~30min,具体的需要我们自己判断哈!
小师妹:颜色这么浅就可以啦....我还一直怕是我看错了,不敢加终止液 大师兄:担心的话也可以通过仪器来判断哈。630nm波长下,标准品S1孔的OD值达到0.6~0.65,就可以终止显色了 小师妹:嗯呐 下次我会随时关注显色颜色变化哒 大师兄:做ELISA实验的时候,有些点你需要特别注意的哈: • 1.移液操作时,酶标板孔中要垂直悬空加入液体,避免加到孔壁上; • 2.实验前将所有试剂平衡至室温; • 3.标准品粉末溶解前需要先短暂离心,使管内标准品全部集中在管底; • 4.实验要做复孔,减少误差; • 5.振荡孵育,加强反应; • 6.每次洗板必须将洗液弃干净; • 7.酶标仪检测前预热,双波长检测; • 8.注意显色判断,适时终止。 大师兄:以后你就是我们实验室了不起的大师姐嘞 小师妹: |