文章目录[隐藏]
- Th检测一般操作步骤
- 人/小鼠/大鼠Th检测方案
- 人全血Th检测为什么要CD3/CD8反设门?
- 如何判断PMA/Ionocymin刺激活化成功?
- 刺激时间如何确定?
- 抗凝剂该如何选择?
- 大鼠全血检测Th的特殊性:
- 联科生物Th检测试剂盒列表
- Human Th1/Th2/Th17 Staining Kit 人Th1/Th2/Th17染色试剂盒
- 定制Human Th1/Th2/Th17 Staining Kit II
- Human Th1/Th2 Staining Kit 人 Th1/Th2 染色试剂盒
- Human Th17 Staining Kit 人 Th17 染色试剂盒
- Mouse Th1/Th2 Staining Kit 小鼠辅助性Th1/Th2细胞检测试剂盒
- Mouse Th17 Staining Kit 小鼠辅助性Th17细胞检测试剂盒
Th检测一般操作步骤
人/小鼠/大鼠Th检测方案
人/大鼠Th1/Th2CD3/CD8/IFN-γ/IL-4 | 人/大鼠Th17CD3/CD8/IL-17A |
小鼠Th1/Th2CD3/CD4/IFN-γ/IL-4 | 小鼠Th17CD3/CD4/IL-17A |
人全血Th检测为什么要CD3/CD8反设门?
PMA/Ionocymin刺激后,CD4分子发生内吞,表面检测到的CD4分子少,所以人全血Th检测要CD3/CD8反设门。
如何判断PMA/Ionocymin刺激活化成功?
刺激时间如何确定?
图:对刺激时间做了不同时间点的摸索,发现刺激5小时时效果最佳; 对于初次实验,需要做一下预实验,确定最佳条件。
抗凝剂该如何选择?
由上图可知,抗凝剂选择肝素钠或肝素锂,不影响Th细胞的活化和细胞因子的分泌。
非肝素抗凝血(如ETDA、枸橼酸钠抗凝血),可通过淋巴细胞分离液处理后,再进行刺激/阻断,仍然可以检测到细胞因子,如下图:
人EDTA抗凝血(Th1)
大鼠全血检测Th的特殊性:
- 大鼠全血(即便是肝素抗凝)如直接用PMA/Ionomycin刺激,在后续实验过程中无法溶血,影响检测;
解决办法:使用大鼠淋巴细胞分离液提取PBMC,分离后用PMA/Ionomycin刺激 - 大鼠CD4在刺激后也会内陷,须用CD3/CD8反设门;
- 目前还没有大鼠CD69抗体,也没有其他报道的可指示活化成功的指标,无法判断活化是否成功;
图:SD大鼠肝素抗凝血(A)、EDTA抗凝血(B)和枸橼酸钠抗凝血(C)经大鼠淋巴细胞分离液分离得到PBMC后,流式检测Th1。
联科生物Th检测试剂盒列表
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- KTH001
- Th/Treg分型检测试剂盒
Human Th1/Th2/Th17 Staining Kit 人Th1/Th2/Th17染色试剂盒
- ¥3,200.00 – ¥12,000.00
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- KTH002
- Th/Treg分型检测试剂盒
定制Human Th1/Th2/Th17 Staining Kit II
- ¥3,200.00
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- KTH101
- Th/Treg分型检测试剂盒
Human Th1/Th2 Staining Kit 人 Th1/Th2 染色试剂盒
- ¥2,550.00 – ¥9,580.00
-
- KTH117
- Th/Treg分型检测试剂盒
Human Th17 Staining Kit 人 Th17 染色试剂盒
- ¥2,680.00 – ¥10,050.00
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- KTH201
- Th/Treg分型检测试剂盒
Mouse Th1/Th2 Staining Kit 小鼠辅助性Th1/Th2细胞检测试剂盒
- ¥1,850.00 – ¥6,940.00
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- KTH217
- Th/Treg分型检测试剂盒
Mouse Th17 Staining Kit 小鼠辅助性Th17细胞检测试剂盒
- ¥1,940.00 – ¥7,290.00