紫色激光的明亮替代产品 Super Bright 系列染料

Super Bright 系列染料目前有4种选择

Super Bright 436 染料
Invitrogen™ eBioscience™ Super Bright 436 染料的最大激发波长为 414 nm，发射峰为 436 nm。推荐使用 450/50 带通滤波器或等效滤波器，与 Invitrogen™ eFluor™ 450 染料或 Invitrogen™ Pacific Blue™ 染料近似。Super Bright 436 染料-偶联物抗体的亮度显著强于 eFluor 450 染料偶联物，可替换 Brilliant Violet™ 421 偶联物，具有近似的阳性和阴性种群分辨率。稳定性研究显示当染色细胞暴露于甲醛固定剂长达三天或在未遮盖的情况下置于环境光线下过夜，Super Bright 436 染料仅有微小的荧光损失。

图 1.Super Bright 436 染料性能比较。经 Anti-Ly-6A/E（克隆号 D7）APC 染色的小鼠骨髓细胞以及分别与 Super Bright 436 染料（左图）、eFluor 450 染料（中图） 或 Brilliant Violet 421 染料（右图）偶联的抗 CD117（克隆号 2B8）。
Super Bright 600 染料
Invitrogen™ eBioscience™ Super Bright 600 染料是含有 Super Bright 436 染料的串联染料，是发射波长为 600 nm 的受体染料。可使用 610/20 带宽滤波器检测。与这种串联聚合物染料偶联的抗体在亮度上和 Brilliant Violet™ 605 染料偶联物具有可比性。Super Bright 600 染料偶联抗体储存在甲醛固定剂中时可稳定保存长达三天。

图 2.多重流式细胞分析实验。在 Super Bright 染色缓冲液中稀释正常人外周血细胞，然后用所指示的试剂进行表面染色。活性细胞（使用可固定活性染料确定）被用于确定多种 T 细胞亚群的分析。
Super Bright 染色缓冲液
连同其他聚合物染料，当在同一实验中使用多种 Super Bright 染料偶联抗体时，可能发生非特异性染料间相互作用。当发生这一情况时，这些相互作用可能导致意外的种群迁移。在加入 Super Bright 偶联物前，使用 Super Bright 染色缓冲液 （产品目录号 SB-4400-42），以减少这一情况，将种群恢复到散点图中预期的位置。当联合其他聚合物染料（如 Brilliant Violet 染料）使用 Super Bright 染料时，可使用 Super Bright 染色缓冲液最大程度减少染料间相互作用。Super Bright 染色缓冲液使用配方为 5 µL/次检测，方便在制备混合液时使用。

注意：Super Bright Staining Buffer is not compatible with UltraComp eBeads microspheres.

图 3.Super Bright 染色缓冲液减少非特异性聚合物染料相互作用。(A) 人外周血液经抗 CD8a（克隆号 RPA-T8）Super Bright 600 染料和抗 CD4（克隆号 SK3） Super Bright 436 染料染色前，加入流式细胞分析染色缓冲液 （顶部散点图） 或 Super Bright 染色缓冲液 （底部散点图）。(B) 人外周血液经抗 CD8a（克隆号 SK1）Brilliant Violet 605 染料和抗 CD4（克隆号 SK3）Super Bright 436 染料染色前，加入流式细胞分析染色缓冲液（顶部散点图）或 Super Bright 染色缓冲液（底部散点图）。(C) 人外周血液经抗 CD8a（克隆号 RPA-T8）Super Bright 600 染料和抗 CD4（克隆号 SK3）Brilliant Violet 421 染料染色前，加入流式细胞分析染色缓冲液（顶部散点图）或 Super Bright 染色缓冲液（底部散点图）。