分享|流式细胞术检测信号及意义
流式细胞术的应用颇为广泛,利用两种检测信号可实现对细胞大小、颗粒度及内部结构(如细胞器)、细胞状态(凋亡/周期)、细胞内离子(Ca2+、pH、ROS)、细胞表型等的检测分析。
流式细胞术的应用颇为广泛,利用两种检测信号可实现对细胞大小、颗粒度及内部结构(如细胞器)、细胞状态(凋亡/周期)、细胞内离子(Ca2+、pH、ROS)、细胞表型等的检测分析。
流式细胞术(flow cytometry, FCM)是当代最先进的细胞分析技术之一,包括各种细胞的计数、细胞中抗原分子的检测、细胞中DNA和RNA的倍体分析、细胞的生物学特性及功能分析等。在血液学检测中,应用FCM分析的样本多为外周血、骨髓、各类体液(如脑脊液、胸水、腹水)以及人体的组织(如淋巴结、脾、肝等),下面我们将介绍这几种常见样本的制备方法,样本制备的好坏对最终的检测结果有很大影响。 外周…
调节性 T 细胞(Tregs),曾被称为抑制性 T 细胞,是 T 细胞的亚群,可调节免疫系统、维持对自身抗原的耐受、抑制自身免疫疾病。Tregs 具有免疫抑制性,可抑制或下调效应 T 细胞的诱导和增殖。调节性 T 细胞有多种类型,其中研究最深的一类表达 CD4、CD25 和 FOXP3(CD4+CD25+调节性 T 细胞)。
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大鼠肝脏匀浆 方法一 提取缓冲液:PBS,pH 7.2,0.05%叠氮钠、0.5%Triton X-100,和蛋白酶抑制剂混合物 步骤:脂多糖(10 mg/mL生理盐水),按15毫克/千克静脉注射以处死老鼠。杀死后,迅速切除肝脏,冲洗血液,在预冷提取缓冲液中研磨。然后超声处理10分钟。匀浆在12000 x g下离心10分钟。取上清备用。 参考文献:Reference: Borovikova, L.…
细胞凋亡的途径主要有两条,外源性途径通过胞外信号激活细胞内的凋亡酶Caspase;内源性途径通过线粒体释放凋亡酶激活因子激活Caspase。这些活化的Caspase可将细胞内的重要蛋白降解,引起细胞的凋亡。
细胞凋亡的概念 细胞凋亡(Apoptosis):属于细胞程序性死亡(Programmed Cell Death,PCD),是为维持内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡,属于细胞的“自杀”行为。细胞凋亡是细胞的一种基本生物学现象,在多细胞生物中去除不需要的或异常的细胞中起着必要的作用。 细胞死亡的方式主要分为凋亡、坏死、自噬和焦亡4类。其中凋亡属于细胞的“…