裂红法vs密度梯度离心法

进行流式实验时,样本处理至关重要,不当的样本处理会导致实验结果的失败。今天,小科来聊聊血液样本在流式实验中的处理方法。 血液样本是天然的单细胞悬液,包含红细胞、白细胞和血小板等多种成分。其中白细胞细分为有粒白细胞(中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞)和无粒白细胞(单核细胞和淋巴细胞),是机体免疫系统的关键组成部分。 目前血液样本常见的两种处理方法:一种是裂红法另一种是离心法,该如何选择呢?小科…

重组蛋白知多少?

01什么是重组蛋白 重组蛋白是通过重组DNA或重组RNA的技术,利用蛋白表达系统,获得具有一定功能和活性的蛋白质,重组蛋白的表达系统主要分为原核表达系统和真核表达系统。原核表达系统最常见的是利用大肠杆菌进行表达,真核表达系统主要为酵母蛋白表达、哺乳动物细胞蛋白表达(例如CHO细胞、HEK293细胞)、昆虫细胞蛋白表达。 02重组蛋白在科研实验中的应用 重组蛋白在科研实验中有广泛的应用,主要包括以下…

Accutase酶:凋亡检测最佳辅助

在体外培养黏附细胞时,常常需要消化分离细胞,消化分离的细胞后续进行细胞转染实验、细胞迁徙实验、细胞增殖实验、及分析检测(如流式细胞术),对于上述实验,大家通常使用蛋白酶进行消化分离细胞,然而这些酶(如胰酶)对细胞损伤比较厉害,而Accutase 是一种天然的酶,兼具蛋白水解酶和胶原酶的活性。但它比胰酶和胶原酶更有效,使用浓度更低,使之毒性更小、更温和,因此对细胞的损伤更小,可减少因消化处理带来的假…

无血清培养基-细胞培养的新宠

培养基是细胞培养的核心材料,是进行科学研究实验的重要工具,其为细胞生长提供营养、调节细胞生存环境,确保无毒无污染的细胞生长环境。随着生命科学和生物医药的进步,对高质量培养基的需求持续增长。 细胞培养基的分类 根据成分来源分为天然培养基和人工或合成培养基。 天然培养基的成分源自生物体自然存在的体液,如血清、血浆或动物体液等,以其丰富的营养成分著称,为细胞培养提供了优越的环境。然而,尽管其效果显著,但…

鼠鼠我呀!动物实验模型,你选对了吗?

[pr_content_block id="21972" title="post-footer"] 在生物医学研究中,选择合适的动物模型至关重要。大小鼠和豚鼠是最常用的动物模型之一。根据研究目的、研究领域的特性以及实验条件等多种因素进行选择,能够更准确地模拟人类疾病过程,提高实验数据的可靠性,为生物医学研究提供强有力的支持。本文将详细绍大小鼠和豚鼠的特点、适用性以及主要应用领域。 ONE大鼠 「&…

流式实验图有点难吗~小科教你轻松看懂!

目前常见流式图有一维直方图、二维散点图、等高线图、密度图等多种,小科这里主要对常见的流式图类型以及常见问题进行介绍。 01单参数直方图 每一个细胞单参数的测量数据可以整理成统计分布,以直方图的方式来显示。在直方图中,横坐标表示荧光信号或散射光信号相对强度的值,可以是线形或者对数,纵坐标一般是细胞数。利用直方图来设门分析,可得到细胞数目、门内细胞百分比等统计参量,总的来说单参数直方图只能表示具有同一…

流式非特异性荧光的照妖镜-同型对照

什么是同型对照 同型对照是指与检测抗体相同种属来源、相同亚型、相同荧光标记,但对目标靶点没有特异性结合的抗体。它能让非特异性荧光现原形,从而得到真正的阳性目的细胞群。 同型对照的作用 衡量抗体与抗原的非特异性结合造成的背景染色情况。 为何需要同型对照 我们都知道抗体是由Fab和Fc构成的(Y字型),其中Fab端是可变区域,能与抗原特异性结合,而Fc端是恒定的,它可以和我们表达Fc受体的细胞非特异结…

五颜六色的真空采血管,你用对了吗?

血清和血浆是ELISA实验中最常用的样本类型,那如何从“赤橙黄绿青蓝紫黑灰”的采血管中挑选适合采集血清血浆的采血管呢?9种颜色头盖的采血管个个身怀绝技,有什么不同和用途呢?别急!小科给您支妙招! ELISA实验前血清和血浆的制备: 血清样本:用红管或橘红色管收集全血。血样凝集30分钟后,1,000× g 离心10分钟,取上清,对上清进行分装保存。-20℃保存,1个月。-80℃,保存3个月。 血浆样…