流式三要素之一|仪器篇

流式细胞术是一种对溶液中单个细胞或颗粒进行快速、多参数分析的技术。流式细胞仪利用激光作为光源,照射在细胞上,产生散射光和荧光信号,由检测器如光电二极管或光电倍增管读取。之后,这些信号被转换成电子信号,由计算机进行分析,并写入标准格式(.fcs)数据文件。另外,细胞群可以根据其荧光或散射光的特性进行分析或分选。 用于流式细胞术的仪器在过去的几十年里不断“进化”着,以满足越来越多的科研与临床应用需求。…

流式三要素之一|样本篇

做流式实验需要仪器、样本以及试剂,对于流式实验而言,样本质量的高低对最终的检测结果有很大的影响。进行流式实验的样本多为外周血、骨髓、各类体液(如脑脊液、胸水、腹水)以及人体的组织(如淋巴结、脾、肝等)。不同的样本处理方法不同,想要获得好的检测结果,样本的制备和保存很关键。 本文就为大家分享各种样本的详细处理方法。 1.外周血/骨髓 样本保存: 收集样本后置于加有抗凝剂(一般选择肝素或EDTA)的试…

流式细胞术—FAQ(二)

11. 为什么检测小鼠CD3ε而不是CD3? CD3是由多条肽链组成的复合体,包括CD3ε, CD3δ, CD3γ, 和CD3ζ。其中,CD3ε是最常用的标记,因为它在T细胞中相对特异性地表达,并且可以单独作为一个可靠的标志。相比于整个CD3复合体更具特异性,可以减少检测中的非特异性信号或交叉反应,提升检测的灵敏度和准确性。 12. CD8和CD8α的区别? CD8是一个复合体,由CD8α 和CD…

流式细胞术—FAQ(一)

1.流式染色条件是什么?   一般推荐室温染色15分钟;或4℃染色30分钟。具体请参照抗体说明书。 2.Th检测为什么要使用刺激阻断剂? 正常情况下,外周血中仅有极少量的Th1、Th2,IFN-γ、IL-4含量极少,无法检测到,需要刺激剂(PMA/Ionomycin Mixture)将Th细胞刺激分泌细胞因子,细胞因子产生后会被分泌到细胞外,无法进行检测。加入阻断剂 (BFA/Monensin M…

流式实验中不可或缺的试剂—辅助试剂

对于辅助大家肯定不陌生,玩游戏的都知道,辅助在团队中的位置是必不可少的,一个优秀的辅助,可以在游戏中给你增加更多buff。 在实验中,有些试剂是被称为辅助试剂,下面给大家介绍下联科的流式辅助试剂。 01/红细胞裂解液(溶血剂) 利用低渗原理破碎血液或骨髓标本中的红细胞,氯化铵是红细胞裂解液的主要效应物质,氨根离子不能通过细胞膜,而其他离子可以通过,造成细胞内外的离子浓度差异,形成了渗透压差,外部的…

干货分享 | 辅助试剂助力流式检测更高效、稳定完成

在流式检测实验中,由于实验性质、检测指标的不同,需要相应的流式辅助试剂来对整个检测进行辅助,才能达到预期的实验结果。辅助试剂也许并不那么起眼,但不可或缺。 杭州联科依据不同的实验需求,专业研发流式染色缓冲液、细胞固定液、细胞破膜剂、细胞刺激剂、细胞阻断剂、FcR抗体、红细胞裂解液、淋巴细胞分离液等一系列辅助试剂,应有尽有,助您流式实验尽在掌握。 01 流式染色缓冲液 流式是一项活细胞检测的技术,一…

你知道体液免疫的驱动精灵吗?

Th2细胞在免疫系统中扮演什么角色呢?Th细胞的主要参与者有T细胞受体(TCR)、共刺激分子分化抗原簇CD28和 MHC II抗原呈递细胞(APC)。Th2细胞由IL-4特异性刺激活化。Th2细胞通过生成各种细胞因子来介导针对细胞外过敏原、寄生虫、细菌以及毒素的体液免疫,是人体液免疫重要的“驱动精灵”。

Th17检测有困难?这份攻略帮你解决

通常所说的Th17是指在各种生理与病理条件下有能力分化为Th17的辅助性T细胞 (严格意义上是Th0)。当受到外界因素(如刺激素、病原体等)刺激,Th0即会向Th1、Th2、Th17等Th细胞分化。此时,通过检测分泌的细胞因子(如IFN-γ、IL-4、IL-17等)实现对各类Th细胞的检测。Th17主要分泌IL-17、IL-22等促炎因子,介导自身免疫性疾病和炎症反应。 静息状态下Th0分化为Th…