流式荧光多种多样,你都清楚吗?
大家都知道流式实验的三大要素是样本(细胞或颗粒)、流式细胞仪和荧光素偶联抗体,本期让小科带大家来了解下常见荧光素的特点。 荧光素按激发光波长来分,主要是激发波长为375 nm、405 nm、488 nm和633 nm 4类,其中,常用的是激发波长为488 nm和633 nm的荧光素,如FITC、PE、APC、PI等。 1.激发波长为488 nm的荧光素 异硫氰酸荧光素 Luorescein iso…
大家都知道流式实验的三大要素是样本(细胞或颗粒)、流式细胞仪和荧光素偶联抗体,本期让小科带大家来了解下常见荧光素的特点。 荧光素按激发光波长来分,主要是激发波长为375 nm、405 nm、488 nm和633 nm 4类,其中,常用的是激发波长为488 nm和633 nm的荧光素,如FITC、PE、APC、PI等。 1.激发波长为488 nm的荧光素 异硫氰酸荧光素 Luorescein iso…
对于辅助大家肯定不陌生,玩游戏的都知道,辅助在团队中的位置是必不可少的,一个优秀的辅助,可以在游戏中给你增加更多buff。 在实验中,有些试剂是被称为辅助试剂,下面给大家介绍下联科的流式辅助试剂。 01/红细胞裂解液(溶血剂) 利用低渗原理破碎血液或骨髓标本中的红细胞,氯化铵是红细胞裂解液的主要效应物质,氨根离子不能通过细胞膜,而其他离子可以通过,造成细胞内外的离子浓度差异,形成了渗透压差,外部的…
2024年6月18日,南方医科大学石敏、廖旺军研究团队在Cell子刊Cell Metabolism(IF=27.7)上发表了标题为“Nicotinamide metabolism face-off between macrophages and fibroblasts manipulates the microenvironment in gastric cancer”的研究文章,通过转录组分析和…
进行流式实验时,样本处理至关重要,不当的样本处理会导致实验结果的失败。今天,小科来聊聊血液样本在流式实验中的处理方法。 血液样本是天然的单细胞悬液,包含红细胞、白细胞和血小板等多种成分。其中白细胞细分为有粒白细胞(中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞)和无粒白细胞(单核细胞和淋巴细胞),是机体免疫系统的关键组成部分。 目前血液样本常见的两种处理方法:一种是裂红法另一种是离心法,该如何选择呢?小科…
目前常见流式图有一维直方图、二维散点图、等高线图、密度图等多种,小科这里主要对常见的流式图类型以及常见问题进行介绍。 01单参数直方图 每一个细胞单参数的测量数据可以整理成统计分布,以直方图的方式来显示。在直方图中,横坐标表示荧光信号或散射光信号相对强度的值,可以是线形或者对数,纵坐标一般是细胞数。利用直方图来设门分析,可得到细胞数目、门内细胞百分比等统计参量,总的来说单参数直方图只能表示具有同一…
什么是同型对照 同型对照是指与检测抗体相同种属来源、相同亚型、相同荧光标记,但对目标靶点没有特异性结合的抗体。它能让非特异性荧光现原形,从而得到真正的阳性目的细胞群。 同型对照的作用 衡量抗体与抗原的非特异性结合造成的背景染色情况。 为何需要同型对照 我们都知道抗体是由Fab和Fc构成的(Y字型),其中Fab端是可变区域,能与抗原特异性结合,而Fc端是恒定的,它可以和我们表达Fc受体的细胞非特异结…
2024年3月9日,中国武汉大学中南医院放射科Tianliang Li ,Haibo Xu等老师在Advanced Science(IF=15.1)上,在线发表题为“Metabolism/Immunity Dual-Regulation Thermogels Potentiating Immunotherapy of Glioblastoma Through Lactate-Excretion I…
在流式检测实验中,除了血液样本,几乎所有的样本均为实体组织,如脾脏、肝脏、肾脏、脂肪、肿瘤等,那么为了做好流式的检测,我们首先得将实体组织消化成为活性较佳的单细胞悬液。 那么怎样得到活性较佳的单细胞悬液呢?今天小科为大家带来客户咨询最多的实体组织的单细胞悬液提取,以小鼠脾脏、小鼠肿瘤组织的提取为例,感兴趣的话就跟小科一起往下学习吧。 一、小鼠脾脏单细胞悬液制备 脾脏是体内最大的免疫器官,含有大量的…