ELISA通关必备丨操作篇丨常见问题及解决方案

一、为什么所有试剂和检测样本要平衡至室温后再进行加样操作? 温度是ELISA结合反应的重要影响因素。为了使所有样本在一致的温度下反应,实验前务必将所有试剂平衡至室温,包括检测样本。避免因温度的动力学反应差异而导致ELISA检测结果的不准确。 二、如何获得良好线性的标准曲线? 按照推荐方式保存标准品;溶解标准品之前需短暂离心,彻底收集粉末;确保标准品完全溶解和混匀(大约10min),然后再进行后续的…

ELISA通关必备丨操作篇丨溶解与稀释标准品

ELISA标准曲线是结果计算的尺子,标准品是ELISA 实验成功与否的关键点。怎样正确溶解、稀释标准品呢? 粉末标准品短暂离心,让因运输沾到管盖、管壁的标准品沉到管底。 根据瓶标签加入一定体积的蒸馏水,加水后轻柔涡旋震荡,室温静置溶解 10-30min,让粉末完全溶解。注意:加水后暂不用移液枪吹吸,避免蛋白未溶解,枪头带出部分蛋白,待完全溶解后可吹吸或涡旋振荡混匀。 标准品梯度稀释: 标准品稀释液…

ELISA通关必备丨样本篇丨不常见样本

利用ELISA(酶联免疫吸附测定)进行检测的样本类型包括常见的血液(血清、血浆),组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清以及不常见的皮肤组织、尿液、粪便、肺泡灌洗液、唾液、脑脊液、胸腹水等,这些样本收集的时间、处理方法和保存都会影响到ELISA实验的结果。下面对几种不常见样本处理方法整理,希望对您有所帮助。 唾液 在唾液样本采集之前,受试者被建议不要吃东西、抽烟或喝饮料。用盐水彻底漱口后,采集唾液3 …

ELISA通关必备丨样本篇丨常见样本丨细胞

利用ELISA(酶联免疫吸附测定)进行检测的样本类型包括常见的血液(血清、血浆),组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清以及不常见的皮肤组织、尿液、粪便、肺泡灌洗液、唾液、脑脊液、胸腹水等,这些样本收集的时间、处理方法和保存都会影响到ELISA实验的结果。下面对常见细胞样本处理方法整理,希望对您有所帮助。 细胞样本根据目的物所在部位可选择细胞裂解液或细胞培养上清作为样本。 需要注意的是: 因该类样本干…

ELISA通关必备丨如何选择试剂盒

小伙伴们为ELISA实验选购试剂盒时,是不是有很多问号?选什么物种?什么指标?什么检测限?怎样的精密度,稀释线性,特异性是优秀的? 小科整理了ELISA产品相关要素,助您五分钟掌握如何选到适合自己实验的试剂盒。 ELISA产品选择要素 根据实验物种及待检样品性质来选择种属:人、小鼠、大鼠、鸡、牛、猴等;样本类型:血清、血浆、组织培养上清、组织或细胞裂解物。 根据样品中检测物水平选择宽动力学检测范围…

ELISA通关必备丨基础知识

ELISA Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay 酶联免疫吸附检测,利用抗原抗体的特异性反应,对样本中可溶性目的产物进行定量检测。 ELISA 与常规免疫实验对比 ELISA样本制备简单;灵敏度高(pg/ml);特异性强;重复性好;操作简单;检测仪器易获得。 Western Blot IHC/IF ELISA 定性 定性 定性 半定量 半定量 定量 半定位 定位 非…

真?假?ELISA试剂盒选择要小心

要问科研最怕遇到的糟心事,非买到假冒科研试剂莫属了,用假冒试剂无非导致两种结果:实验失败or被动学术造假。ELISA试剂盒门槛较低,制假相对简单,常有不法商家打着种属全、指标全、现货供应的旗号来生产、销售假冒ELISA试剂盒,曾有老师吐槽“每个月都能收到好几个从未听过的厂商向我推销ELISA试剂盒”。针对ELISA试剂盒真假问题,我们整理了一些辨别经验(购买前and购买后),希望对大家有所帮助。 …