流式三要素之一|仪器篇
流式细胞术是一种对溶液中单个细胞或颗粒进行快速、多参数分析的技术。流式细胞仪利用激光作为光源，照射在细胞上，产生散射光和荧光信号，由检测器如光电二极管或光电倍增管读取。之后，这些信号被转换成电子信号，由计算机进行分析，并写入标准格式(.fcs)数据文件。另外，细胞群可以根据其荧光或散射光的特性进行分析或分选。 用于流式细胞术的仪器在过去的几十年里不断“进化”着，以满足越来越多的科研与临床应用需求。…
2025-03-18
流式三要素之一|样本篇
做流式实验需要仪器、样本以及试剂，对于流式实验而言，样本质量的高低对最终的检测结果有很大的影响。进行流式实验的样本多为外周血、骨髓、各类体液（如脑脊液、胸水、腹水）以及人体的组织（如淋巴结、脾、肝等）。不同的样本处理方法不同，想要获得好的检测结果，样本的制备和保存很关键。 本文就为大家分享各种样本的详细处理方法。 1.外周血/骨髓 样本保存： 收集样本后置于加有抗凝剂（一般选择肝素或EDTA）的试…
2025-03-11
流式细胞术—FAQ（二）
11. 为什么检测小鼠CD3ε而不是CD3？ CD3是由多条肽链组成的复合体，包括CD3ε, CD3δ, CD3γ, 和CD3ζ。其中，CD3ε是最常用的标记，因为它在T细胞中相对特异性地表达，并且可以单独作为一个可靠的标志。相比于整个CD3复合体更具特异性，可以减少检测中的非特异性信号或交叉反应，提升检测的灵敏度和准确性。 12. CD8和CD8α的区别？ CD8是一个复合体，由CD8α 和CD…
2025-01-21
流式细胞术—FAQ（一）
1.流式染色条件是什么？ 一般推荐室温染色15分钟；或4℃染色30分钟。具体请参照抗体说明书。 2.Th检测为什么要使用刺激阻断剂？ 正常情况下，外周血中仅有极少量的Th1、Th2，IFN-γ、IL-4含量极少，无法检测到，需要刺激剂（PMA/Ionomycin Mixture）将Th细胞刺激分泌细胞因子，细胞因子产生后会被分泌到细胞外，无法进行检测。加入阻断剂 （BFA/Monensin M…
2025-01-14
流式实验中不可或缺的试剂—辅助试剂
对于辅助大家肯定不陌生，玩游戏的都知道，辅助在团队中的位置是必不可少的，一个优秀的辅助，可以在游戏中给你增加更多buff。 在实验中，有些试剂是被称为辅助试剂，下面给大家介绍下联科的流式辅助试剂。 01/红细胞裂解液（溶血剂） 利用低渗原理破碎血液或骨髓标本中的红细胞，氯化铵是红细胞裂解液的主要效应物质，氨根离子不能通过细胞膜，而其他离子可以通过，造成细胞内外的离子浓度差异，形成了渗透压差，外部的…
2024-09-20
流式系列二 | 周期检测方法及常见问题一网打尽
01细胞周期检测方法（两种） 1、一步法活细胞检测 1.1样品制备，收集2×105-1×106个活细胞，离心弃上清，用PBS洗涤一次，离心弃上清 1.2复染，加入1 m L DNA staining solution（Cat#CCS01），涡旋振荡5 - 10秒混匀。室温避光孵育30分钟，进行流式检测。 2、活细胞/固定细胞检测 2.1可当天检测的活细胞样本 2.1.1收集2×105-1×106个…
2024-05-15
小课堂 | 细胞周期及其检测
检测细胞周期常用的方法是检测DNA含量，可以选择能与DNA结合的荧光染料（如PI等），再根据细胞各个时期DNA含量不同从而荧光强度不同的方法，分析各个阶段的细胞比例。
2021-11-24
细胞周期检测-知识点汇总
细胞周期检测是很常见的一种流式检测类型。流式细胞术通过DNA染料（如PI）分析细胞周期，需加入RNase去除RNA影响。检测时不应洗涤，以免染料丢失。固定细胞和活细胞的检测方法不同，固定细胞需用乙醇处理，而活细胞检测可使用特定试剂盒。更多周期检测信息，实验步骤视频...
2020-01-19
