流式细胞术—FAQ(一)

1.流式染色条件是什么?   一般推荐室温染色15分钟;或4℃染色30分钟。具体请参照抗体说明书。 2.Th检测为什么要使用刺激阻断剂? 正常情况下,外周血中仅有极少量的Th1、Th2,IFN-γ、IL-4含量极少,无法检测到,需要刺激剂(PMA/Ionomycin Mixture)将Th细胞刺激分泌细胞因子,细胞因子产生后会被分泌到细胞外,无法进行检测。加入阻断剂 (BFA/Monensin M…

流式实验中不可或缺的试剂—辅助试剂

对于辅助大家肯定不陌生,玩游戏的都知道,辅助在团队中的位置是必不可少的,一个优秀的辅助,可以在游戏中给你增加更多buff。 在实验中,有些试剂是被称为辅助试剂,下面给大家介绍下联科的流式辅助试剂。 01/红细胞裂解液(溶血剂) 利用低渗原理破碎血液或骨髓标本中的红细胞,氯化铵是红细胞裂解液的主要效应物质,氨根离子不能通过细胞膜,而其他离子可以通过,造成细胞内外的离子浓度差异,形成了渗透压差,外部的…

流式系列二 | 周期检测方法及常见问题一网打尽

01细胞周期检测方法(两种) 1、一步法活细胞检测 1.1样品制备,收集2×105-1×106个活细胞,离心弃上清,用PBS洗涤一次,离心弃上清 1.2复染,加入1 m L DNA staining solution(Cat#CCS01),涡旋振荡5 - 10秒混匀。室温避光孵育30分钟,进行流式检测。 2、活细胞/固定细胞检测 2.1可当天检测的活细胞样本 2.1.1收集2×105-1×106个…

小课堂 | 细胞周期及其检测

检测细胞周期常用的方法是检测DNA含量,可以选择能与DNA结合的荧光染料(如PI等),再根据细胞各个时期DNA含量不同从而荧光强度不同的方法,分析各个阶段的细胞比例。

细胞周期检测-知识点汇总

细胞周期检测是很常见的一种流式检测类型。流式细胞术通过DNA染料(如PI)分析细胞周期,需加入RNase去除RNA影响。检测时不应洗涤,以免染料丢失。固定细胞和活细胞的检测方法不同,固定细胞需用乙醇处理,而活细胞检测可使用特定试剂盒。更多周期检测信息,实验步骤视频...