流式细胞术—FAQ(二)

11. 为什么检测小鼠CD3ε而不是CD3? CD3是由多条肽链组成的复合体,包括CD3ε, CD3δ, CD3γ, 和CD3ζ。其中,CD3ε是最常用的标记,因为它在T细胞中相对特异性地表达,并且可以单独作为一个可靠的标志。相比于整个CD3复合体更具特异性,可以减少检测中的非特异性信号或交叉反应,提升检测的灵敏度和准确性。 12. CD8和CD8α的区别? CD8是一个复合体,由CD8α 和CD…

流式细胞术—FAQ(一)

1.流式染色条件是什么?   一般推荐室温染色15分钟;或4℃染色30分钟。具体请参照抗体说明书。 2.Th检测为什么要使用刺激阻断剂? 正常情况下,外周血中仅有极少量的Th1、Th2,IFN-γ、IL-4含量极少,无法检测到,需要刺激剂(PMA/Ionomycin Mixture)将Th细胞刺激分泌细胞因子,细胞因子产生后会被分泌到细胞外,无法进行检测。加入阻断剂 (BFA/Monensin M…

一文掌握ELISA实验显色判断、数据分析及标曲拟合

ELISA显色判断 如何控制标曲显色?(仅针对双抗夹心法ELISA试剂盒) 5 - 30分钟显色时间为经验范围,每个具体的实验,可根据以下情况,确定大致的显色时间: 方法一 肉眼观察:标曲S5孔有淡蓝色、Blank孔无明显蓝色时,即可终止; 方法二 仪器判断:630 nm左右波长下,标曲S1孔的OD值达到0.5 - 0.7、S5孔的OD值达到0.05 - 0.08、Blank孔的OD值小于0.05…

流式荧光多种多样,你都清楚吗?

大家都知道流式实验的三大要素是样本(细胞或颗粒)、流式细胞仪和荧光素偶联抗体,本期让小科带大家来了解下常见荧光素的特点。 荧光素按激发光波长来分,主要是激发波长为375 nm、405 nm、488 nm和633 nm 4类,其中,常用的是激发波长为488 nm和633 nm的荧光素,如FITC、PE、APC、PI等。 1.激发波长为488 nm的荧光素 异硫氰酸荧光素 Luorescein iso…

炎症免疫造模实验选什么重组蛋白?

当我们做疾病机制、药效模型、药物评估、炎症和免疫反应机制等炎症免疫相关的研究时,可能需要在细胞水平进行炎症免疫造模实验,这时选择合适的诱导因子就显得尤为重要,小科在此隆重推荐IL-1β这个重组蛋白。 1/IL-1β在细胞培养实验中的应用 模拟炎症反应IL-1β重组蛋白可用于体外建立支气管上皮细胞炎症模型,通过炎症因子IL-1β处理HBE细胞,模拟支气管上皮细胞的炎症反应。免疫应答研究IL-1β作为…

揭秘昆虫细胞培养:生物实验室的秘密武器

01 | 什么是昆虫细胞培养 昆虫细胞培养是一种生物工程技术,它涉及在体外条件下对昆虫细胞进行培养和繁殖。这项技术最初始于1915年,经过一百多年的发展,已经在细胞生物学、分子生物学、昆虫学、病毒学、生物化学、遗传学等领域的研究工作中发挥着重要的作用。  02 | 昆虫细胞培养的用途 生产重组蛋白:利用昆虫细胞生产特定蛋白质。 病毒研究:研究病毒如何在昆虫细胞内复制。 生物杀虫剂:开发对特定害虫有…

专利|一种检验凋亡试剂真假的专利

应用Annexin V检测细胞凋亡的亲们 还在为购买的试剂真假担忧吗? 在为凋亡阳性质控而烦恼吗? 补偿调节还顺利吗? 联科生物的发明专利了解一下 应用Annexin V法检测细胞凋亡通常是通过流式细胞仪。利用仪器激光激发荧光染料发出荧光,再通过检测器进行检测分析。但在进行多色分析时,由于不同荧光素的发射光谱之间存在互相重叠现象,需要进行补偿调节。补偿调节时,样本须同时包含阴性细胞群和阳性细胞群,…

IL-2蛋白:免疫细胞培养好助手

01 | 概述 白细胞介素2(Interleukin 2,简称IL-2)是一种免疫调节细胞因子,对于激活的T细胞的增殖、B细胞的分化、自然杀伤细胞、单核细胞和巨噬细胞的发育都非常重要。IL-2通过IL-2受体(IL-2R)传递信号,IL-2R是一个异源三聚体蛋白复合物,其γ链也与白细胞介素4(IL-4)和白细胞介素7(IL-7)共享。在小鼠中,一个与IL-2相似的基因的靶向敲除会导致类似溃疡性结肠…