开学学习计划,如何选择ELISA试剂盒

小伙伴们为ELISA实验选购试剂盒时,是不是有很多问号?什么指标?什么检测限?怎样的精密度,稀释线性,特异性是优秀的? 联科生物整理了一份ELISA选择指南,助您五分钟掌握如何选到适合自己实验的试剂盒。 ELISA产品选择 根据实验物种及待检样品性质来选择 种属:人、小鼠、大鼠、鸡、牛、猴等; 检测指标:炎症因子(IL-1β、IL-6...)、肿瘤坏死因子(TNF-α...)等。 样本类型:血清、…

蛇年第一课|小科带你回顾凋亡实验及其检测要点

细胞凋亡(apoptosis),属于细胞程序性死亡(Programmed Cell Death,PCD),是由基因控制的细胞自主、有序的死亡,在维持生物体内环境稳定方面发挥着重要作用。 细胞凋亡与疾病的关系 对于人而言,健康状况下,机体内细胞凋亡处于一个平衡状态。当细胞凋亡出现异常,就极易引发各种疾病。 细胞凋亡典型特征 从形态学角度观察细胞凋亡,其过程是多阶段的,首先是细胞体积缩小,连接消失,与…

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开学学习计划,ELISA从新手到入门!

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ELISA简介 ELISA即为酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay),是一种常用于检测和定量分析生物样本中抗体、抗原、蛋白质等物质的实验方法。它利用抗原和抗体之间的特异性结合以及酶催化反应的原理,进行定性或定量的分析。 不同ELISA检测方法比较 常见的ELISA有四种,双抗夹心法、直接法、间接法、竞争法。 ELISA实验原理 以市面上最常见的双抗体…

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流式细胞术—FAQ(二)

11. 为什么检测小鼠CD3ε而不是CD3? CD3是由多条肽链组成的复合体,包括CD3ε, CD3δ, CD3γ, 和CD3ζ。其中,CD3ε是最常用的标记,因为它在T细胞中相对特异性地表达,并且可以单独作为一个可靠的标志。相比于整个CD3复合体更具特异性,可以减少检测中的非特异性信号或交叉反应,提升检测的灵敏度和准确性。 12. CD8和CD8α的区别? CD8是一个复合体,由CD8α 和CD…

流式细胞术—FAQ(一)

1.流式染色条件是什么?   一般推荐室温染色15分钟;或4℃染色30分钟。具体请参照抗体说明书。 2.Th检测为什么要使用刺激阻断剂? 正常情况下,外周血中仅有极少量的Th1、Th2,IFN-γ、IL-4含量极少,无法检测到,需要刺激剂(PMA/Ionomycin Mixture)将Th细胞刺激分泌细胞因子,细胞因子产生后会被分泌到细胞外,无法进行检测。加入阻断剂 (BFA/Monensin M…

一文掌握ELISA实验显色判断、数据分析及标曲拟合

ELISA显色判断 如何控制标曲显色?(仅针对双抗夹心法ELISA试剂盒) 5 - 30分钟显色时间为经验范围,每个具体的实验,可根据以下情况,确定大致的显色时间: 方法一 肉眼观察:标曲S5孔有淡蓝色、Blank孔无明显蓝色时,即可终止; 方法二 仪器判断:630 nm左右波长下,标曲S1孔的OD值达到0.5 - 0.7、S5孔的OD值达到0.05 - 0.08、Blank孔的OD值小于0.05…

流式荧光多种多样,你都清楚吗?

大家都知道流式实验的三大要素是样本(细胞或颗粒)、流式细胞仪和荧光素偶联抗体,本期让小科带大家来了解下常见荧光素的特点。 荧光素按激发光波长来分,主要是激发波长为375 nm、405 nm、488 nm和633 nm 4类,其中,常用的是激发波长为488 nm和633 nm的荧光素,如FITC、PE、APC、PI等。 1.激发波长为488 nm的荧光素 异硫氰酸荧光素 Luorescein iso…

炎症免疫造模实验选什么重组蛋白?

当我们做疾病机制、药效模型、药物评估、炎症和免疫反应机制等炎症免疫相关的研究时,可能需要在细胞水平进行炎症免疫造模实验,这时选择合适的诱导因子就显得尤为重要,小科在此隆重推荐IL-1β这个重组蛋白。 1/IL-1β在细胞培养实验中的应用 模拟炎症反应IL-1β重组蛋白可用于体外建立支气管上皮细胞炎症模型,通过炎症因子IL-1β处理HBE细胞,模拟支气管上皮细胞的炎症反应。免疫应答研究IL-1β作为…