ELISA实验结果常见问题解决方案：样本值不佳

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作者：联科生物发布日期：2017-01-23 10:00

ELISA实验标准曲线吸光值、梯度挺好，但是样本值不佳，样本浓度太低或太高，总结原因如下：

序号	可能原因	解决方法
1	标曲选择不合适	选择最合适的标曲拟合。
2	样本含量很低，低于灵敏度无法被检测到	尝试浓缩样本或使用高敏ELISA试剂盒检测。
3	样本含量很高，超过标曲	建议进行预实验摸索稀释倍数，确保样本OD值落在标曲范围内。

ELISA 实验结果重复性不好，可能的原因：

序号	可能原因	解决方法
1	微量加样不准确	保证微量加样的准确性和均一性，定期校准移液器。
2	样品不均一	加样前充分混匀样品，取样确保移液位置一致。
3	加样量不一致	样品稀释前应充分混匀，尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴。
4	孔与孔之间的交叉污染	孵育后取下盖子小心操作，避免孔与孔的污染；封板膜不能重复使用。
5	边缘效应（外周孔显色较中心孔深）	孵育时尽量100 rpm旋转混匀。
6	包被板表面遭到破坏	洗板加样时尽量小心，避免破坏板的包被表面。

联科生物推荐ELISA操作注意事项：加样操作示范。