eBioscience磷酸化抗体破膜缓冲液选择指南

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作者:eBioscience官网 发布日期:2015-01-20 06:00

eBioscience磷酸化抗体破膜缓冲液选择指南eBioscience磷酸化抗体都经过三种buffer(IC fixation and permeabilization, Foxp3/Transcription Factor Buffer, and IC fixation Buffer/Methanol的测试,在抗体说明书上详细告知了最适buffer的种类。由于甲醇会毁坏某些抗体识别的表位,理想的状况是在甲醇作用前做表面marker的标记,这些marker的抗体可以选择甲醇耐受的荧光标记,如eFluor450、FITC或eFluor660。然而另一方面,表面抗体与细胞的结合可能也会引起不必要的激活。
所以,我们推荐在刺激/处理、固定及甲醇处理之后来做表面抗体的标记,不受固定过程影响的抗体克隆号选择,可参考前面的文章“固定破膜对细胞表面抗体的影响”。

Target Clone IC fix/perm Foxp3 IC fix/methanol
pSTAT1 (Y701) KIKSI0803 - - +++
pSTAT4 (Y693) 4LURPIE - - +++
pSTAT5 (Y694) SRBCZX - - +++
pSTAT6 (Y641) CHI2S4N - - +++
pSrc (Y418) SC1T2M3 ++ ++ +++
pZAP-70/SYK Y319/Y352 n3kobu5 ++ ++ +++
pSYK (Y348) moch1ct ++ ++ +++
pBTK/ITK (Y551/Y511) M4G3LN ++ ++ +++
pERK1/2 (T202/Y204) MILAN8R - - +++
pNFkB p65 (S529) B33B4WP +++ - +++
pS6 (Y235/Y236) cupk43k +++ ++ +++
pH2AX (S139) CR55T33 - +++ +++

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