http://www.liankebio.com/article-information_Newsletter-1006.html
作者:QIAGEN官网 发布日期:2016-11-03 09:00
让基因表达分析实现高通量之原理&性能优势 一次性检测84个基因、372个基因不再是问题; 想快速找到差异样本间的差异表达基因,只要会操作qPCR,就会做这个试剂盒; 只要有一台荧光定量试剂盒就能完成整个实验。PCR Array 就是这么超能! 以前只要提到基因表达分析,人们就会想到荧光定量PCR;只要提到高通量基因表达分析,人们会首先想到基因芯片。虽然荧光定量PCR仪几乎每个实验室都有,但是做芯片就不一定每个实验室都具备这个条件了。那么只有一台荧光定量PCR仪是否也能进行高通量的基因表达谱分析呢? QIAGEN 推出的RT2 Profiler PCR Array是一种高度可靠且灵敏的基因表达谱分析技术,它利用实时定量PCR分析信号转导、生物过程或特异性疾病,来研究通路中聚焦的一组基因。每个PCR Array都包含一条通路聚焦的基因以及5个看家基因。此外,每个阵列还包含一组专利对照,用以监控基因组DNA 污染(GDC)、第一链合成(RTC)和实时定量PCR效率(PPC)。 RT2 Profiler PCR Array上的基因是经过大量相关文献阅读选定,专有的引物设计符合超过10个热力学和序列比对要求。每个RT2 Profiler PCR Array含有84/372个在实验平台验证过的目的基因、5个看家基因和一套对照。为实验研究者节省了大量预实验、引物验证、文献选择基因等繁琐的过程,可以直接明了的了解不同课题研究中某信号通路或疾病中关键基因的表达谱。 RT2 Profiler PCR Array原理 RT2 Profiler PCR Arrays是分析一组特定基因表达的可靠工具,引物经过优化。每个96孔板、384孔板或100孔盘PCR芯片都包含SYBR® Green优化的引物分析,可对相关的通路或疾病相关的基因进行细致的研究,并含有相应的RNA质量控制。RT2 Profiler PCR Arrays也可针对您特定的研究兴趣对一些基因作定制化分析。高品质引物设计和RT2 SYBR Green qPCR Mastermix规格使PCR芯片可在统一的循环条件下同时扩增96或384个不同的基因特异性产物。 RT2 Profiler PCR Arrays进行的基因表达分析具有real-time PCR的灵敏度和微阵列的多基因检测能力。这种整合使RT2 Profiler PCR Array具有高特异性和扩增效率,可获得准确的SYBR® Green real-time PCR结果。PCR芯片在任何研究实验室都易于使用。 RT2 Profiler PCR Arrays具有足够高的敏感度,可使用从常规样本(0.1–5 µg RNA)、FFPE样本和小样本(1–100 ng RNA)制备的RNA。 RT2 Profiler PCR Array性能优势 不同使用者均能获得可重复的结果:对比两位科学家(A 和B)在不同的时间使用Human Drug Metabolism RT2 Profiler PCR Arrays重复进行四次实验,获得的原始循环阈限数据(1–4)。结果表明数据间相关性很高(R2 >0.990)。 每次反应都能检测到基因特异性产物:使用TGFβ/BMP Signaling Pathway RT2 Profiler PCR Array区分通用总RNA,然后进行熔解曲线分析。PCR芯片特异性检测个体基因,无论相同RNA样本中相关基因家族成员的表达状态如何。 统一的PCR扩增效率 PCR芯片能够获得高度准确的结果:使用RT2 Profiler PCR Arrays对4000基因进行分析,平均扩增效率为99%。持续的高扩增效率确保PCR芯片能够使用ΔΔCT法准确的同时分析多种基因。 数据分析便利——免费的RT2 Profiler PCR Array的线上数据分析软件可分析原始的CT值,可在几分钟内得到多种形式的结果(散点图、火山图、群集图)。 |