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作者：Eppendorf官网 发布日期：2017-06-02 09:00
| 做实验遭遇细胞系污染的心情无异于得知追了很久的女神（男神）已经有了另一半。 更糟糕的是，这两件事情发生的概率都比想象的高。 HeLa 细胞，细胞界的“隔壁老王” 大名鼎鼎的 HeLa 细胞系是第一株永生化的细胞系，在实验中十分常用。HeLa 细胞系于 1951 年在体外建系，来源于一名叫做 Henrietta Lack 的美国妇女的宫颈癌细胞。 墨菲定律告诉我们事情往往没有那么简单。 仅仅 16 年后就出现了 HeLa 细胞系发生交叉污染的报道 [1,2] 。10 年后，又发现 HeLa 细胞系被其他物种的细胞所污染 [3] 。而已知的被污染的细胞远不止 HeLa 细胞一种。 国际细胞系认证委员会（ICLAC）于 2014 年 10 月公布了调查数据（Version 7.2），列出了 438 种错误的细胞系（false cell lines）和 37 种错认的细胞系（misidentified cell lines），其中 HeLa 细胞系更是以 24% 的污染率成为了最常见的“问题细胞”。 根据 ICLAC 的数据推测，全球已有 15-20% 的细胞系被错误辨识或不再符合原来的细胞系。 细胞的“狸猫换太子”不仅会导致已经发表的论文被撤销，更会耗费实验汪们宝贵的时间和精力。看到这些数字，人生观世界观仿佛都要被重建。 细胞系污染数量如此之巨，到底是因为什么？ ▲ 细胞五大天敌：细菌、病毒、支原体、酵母和其它真核细胞 出现问题的细胞系可以分为错误的细胞系（false cell line）和错认的细胞系（misidentified cell line）。 标记错误是指在细胞的日常培养、管理中由于将标签弄错。恍恍惚惚的随手一贴，你的细胞就已经不是你认识的那个细胞了。 交叉污染则是指细胞系被其他细胞所污染，试剂公用、耗材重复使用或同时操作多种细胞均有可能导致这样的结果。如果外源细胞相较于原细胞系有更快的繁殖速度，那么外源细胞就会逐渐取代原细胞系的地位。 在长期的培养中，即使没有外源细胞的入侵，细胞也有可能因为培养的环境而发生一定的改变，细菌、支原体的污染或者药物的处理也可能会改变细胞的种类。不仅来自外界的污染防不胜防，自家的叛徒也让人心焦。 ▲细胞被交叉污染的过程示意 （绿色表示原有细胞，红色表示其它真核细胞） 细胞系污染问题如此严重，一方面是由于不同来源的细胞污染在日常实验中几乎难以察觉；另一方面，也是因为许多研究人员并未意识到这类风险或对此没有重视。然而存在感越低，搞起事来却越是让人大吃一惊。 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等近年对此多次发出呼吁，要求研究者对细胞进行鉴定。2016 年初，美国卫生研究院发布新指南，其中就提到了细胞系的鉴定问题。该指南指出：研究项目想要获得资金，需要核实在研究中使用的细胞系。此外，越来越多的期刊也要求文章在出版之前对细胞系进行鉴定，确保准确。Nature 杂志更是从 2015 年 5 月份起就已经要求投稿者审查论文中使用的细胞系，以此来确保实验数据的准确性。 为了让实验里不混进奇怪的东西，科学家们也是很拼哒。 |
