ELISA样品处理系列一：小鼠组织处理方法

• 步骤：处死动物并取头部。解剖获取脑区（海马体和皮质）。并用2-甲基丁烷在干冰上快速冷冻。将大脑样本置于含有蛋白酶抑制剂混合物的无菌PBS中，均质。4°C，11000 rpm，离心20分钟。取上清备用。

• 参考文献：Lee, J., S.L. Chan, and M P. Mattson (2002) Adverse effect of a presenilin-1 mutation in microglia results in enhanced nitric oxide and inflammatory cytokine responses to immune challenge in the brain. Neuromolecular Medicine 2(1):29-45
02 小鼠根尖周组织匀浆的制备方法
• 提取缓冲液：10 mM HEPES，100 μg BSA组分V，100 μg Zwittergent-12，50 μg/mL gentamicin，，1 μg/mL aprotinin和leupeptin，0.1 μM EDTA（溶于RPMI 1640）

• 步骤：冷冻的根尖周组织样本，加650-800 μl的提取缓冲液。孵育混合物置于冰上并超声处理20-30秒。离心收集上清液并在-70°C下冷冻保存备用。

• 参考文献：

Balto, K., H. Sasaki, and P. Stashenko (2001) Interleukin-6 deficiency increases inflammatory bone destruction. Infection and Immunity February:744-750

Wang, C.Y. and P. Stashenk (1991) The role of interleukin-1 alpha in the pathogenesis of periapical bone destruction in a rat model system. Oral Microbiol. Immunol. 8:50-56.
03 小鼠脾脏肿瘤及细胞液组分的制备方法
• 提取缓冲液：50 mM磷酸钾，pH 7.1，0.1 M NaCl，2 mM EDTA，0.4 mM phenylmethylsulfonyl fluoride，60 μg/mL soybean trypsin inhibitor，2 μg/mL leupeptin，2 μg/mL aprotinin，2 μg/mL pepstatine

• 步骤：切除脾脏肿瘤组织，立即在液氮中冷冻并在-70 °C下储存。冷冻组织在冰浴预冷提取缓冲液中化冻。冰浴，撕裂组织。然后4℃下，超声处理。4℃下以100000 × g离心15分钟去除碎片，所得上清再次在4℃下以100000 × g离心30分钟。上清液含有胞浆蛋白，颗粒包含膜部分。

• 参考文献：Yao, M., S, Kargman, E.C. Lam, C.R. Kelly, Y.X. Zheng, P. Luk, E. Kwong, J.F. Evans and M.M. Wolfe (2003) Inhibition of cyclooxygenase-2 by rofecoxib attenuates the growth and metastatic potential of colorectal carcinoma in mice. Cancer Research 63(3):586-592