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作者:Life官网 发布日期:2014-03-28 11:00
膜电位——可固定探针
MitoTracker 染料为依赖细胞膜电位的探针,可针对红细胞中的线粒体进行染色。与膜去极化的线粒体相比,MitoTracker 染料在正常运作的线粒体中会产生较强的荧光信号,因此可用于辨识细胞群体中的健康细胞。即便经过后续的免疫细胞化学、DNA末端标记、原位杂交或复染后,MitoTracker 的染色结果仍能保持不变。MitoTracker Red CMXRos(图4)与绿色荧光染料共用时,呈现极低的光谱重叠,而MitoTracker Orange CMTMRos则能与远红荧光染料共用。MitoTracker Red CM-H2Xros及MitoTracker? Orange CM-H2TMRos为需极低荧光背景的实验的最佳选择。
膜电位——不可固定探针 该类染料能针对细胞凋亡时的线粒体膜电位丧失提供快速、简单且可靠的检测。 1.JC-1为阳离子染料,在线粒体中会依据电位而累积,放射出的荧光会因此由绿色(~525 nm)位移至红色(~590 nm),可有效应用于比例测量(图5和6) 2.MitoProbe DilC1(5)及MitoProbe? DiOC2(3) Assay Kit包含carbocyanine染料,可用于测定线粒体膜电位。前者可由红光激发,后者可由蓝光激发。 3.Rhodamine 123及dihydrorhodamine 123可轻易地经运行中的线粒体隔离,而不会导致细胞毒性。这类Rhodamine染料能快速吸收并达到平衡——仅需数分钟的时间,相比之下,其他膜电位敏感染料则需30分钟以上。 4.Tetramethylrhodamine的甲基酯及乙基酯(分别为TMRM及TMRE)可有效用于包含绿色荧光染料的多重颜色应用方法。
线粒体通透孔 线粒体通透孔是由线粒体内外膜成分所构成的非特异性通道,参与了细胞凋亡及坏死时线粒体内成分的释放。MitoProbe? Transition Pore Assay Kit相比于仅依赖线粒体膜电位的实验方法而言,对于线粒体通透性通透孔的开启提供了更直接的测量方法。 |