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作者：Life官网 发布日期：2014-03-28 15:00
| Life Technologies提供了用于细胞功能和健康检测的各种试剂。其中许多分析以荧光或比色法为基础，具有灵敏性、便利性和安全性。这些产品已经过多种仪器平台验证，包括显微镜、流式细胞仪、酶标仪和高内涵筛选，能够实现各种细胞功能的分析： ⇒ 细胞活性和细胞毒性 ⇒ 细胞增殖和细胞周期 ⇒ 细胞凋亡 ⇒ 自噬 ⇒ 氧化应激 ⇒ 内吞作用和吞噬作用 ⇒ 细胞内离子 本文为大家介绍细胞凋亡的产品。 细胞凋亡(细胞程序性死亡)是细胞正常发育过程中，由遗传控制的细胞消亡现象。凋亡调控异常与许多疾病状态有关，例如阿尔茨海默病、中风以及癌症。区别于坏死细胞的是，凋亡细胞的形态学特征为核染色质固缩、细胞皱缩以及产生膜包裹凋亡小体。细胞凋亡的生物化学特征在于基因组的片段化及几种细胞蛋白的解离或降解。 与细胞活性一样，无法通过任何单一参数来准确界定细胞彻底死亡；因而采用几种不同的方法研究细胞凋亡通常十分有利。候选抗肿瘤药物若无法诱导细胞凋亡，其临床功效通常较差，因此凋亡分析成为重要的高通量药物筛选工具。 膜不对称性 1 Annexin结合物 高度荧光物质Annexin V结合物提供快速且可信赖的检测方式，可用于检测细胞凋亡中间阶段指标物phosphatidyl serine的胞外化。Annexin V结合物可有效应用于流式细胞技术及共轭焦或荧光显微技术(图1)，也能与其他染料或抗体共同使用，以便针对凋亡与非凋亡细胞的混合群体进行正确评定。Life Technologies提供超过10种与荧光染料结合的Annexin V，能让研究人员在单一实验中完成多种参数的检测。
2 单体花青素染料 在有些情况下，以Annexin V染色并非检测细胞凋亡的最佳方法，如细胞对于Annexin V所需的高钙离子浓度具高敏感性的实验、贴壁细胞的phosphatidyl serine检测会遭受胰蛋白酶消化的不良影响的实验、限制不得冲洗样本的实验等。 LifeTechnologies提供的PO-PRO?-1、YO-PRO?-1及TO-PRO?-3三种单体花青素染料,可通过因细胞膜对称性丧失造成的膜通透性改变而穿透凋亡细胞。这些染料进入凋亡的细胞后会与核酸结合，而无法穿透的活细胞则可因此被排除。这三种染料具有独特的激发光波长，能在多重分析实验中提供高度灵活性。
3 紫色膜不对称性比率探针/死细胞凋亡试剂盒 Violet Ratiometric Membrane Asymmetry Probe/Dead Cell Apoptosis Kit (A35137)提供了一种利用紫色激光流式细胞仪简单高效地检测细胞凋亡与细胞死亡的方法(图3)。紫色膜不对称性比率探针可检测凋亡过程中细胞膜的不对称性变化。它用于贴壁细胞和悬浮细胞均可获得极佳的性能，且可与其他凋亡指示剂(如caspase检测和线粒体膜电位改变)相关联。 该染料能产生激发态分子内质子迁移(ESIPT)效应，产生波长为530 nm和585 nm的双发射光谱，可对表面电荷的变化产生双重颜色比率的响应。F2N12S探针与SYTOX? AADvanced? 死细胞染料结合，该染料仅能穿过晚期凋亡细胞或坏死细胞的细胞膜，从而将其与早期凋亡细胞区分开来。 与基于Annexin的分析不同，该分析方法无需特殊的缓冲液或冲洗步骤，而且在对贴壁细胞分析时，它不易出现物理或化学清除步骤中常见的细胞膜损伤，从而可以提供更佳的数据质量。
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