Life Technologies细胞内离子测定产品

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作者:Life官网 发布日期:2014-04-25 13:00

Life Technologies提供了用于细胞功能和健康检测的各种试剂。其中许多分析以荧光或比色法为基础,具有灵敏性、便利性和安全性。这些产品已经过多种仪器平台验证,包括显微镜、流式细胞仪、酶标仪和高内涵筛选,能够实现各种细胞功能的分析:

a.细胞活性和细胞毒性 e.氧化应激
b.细胞增殖和细胞周期 f.内吞作用和吞噬作用
c.细胞凋亡 g.细胞内离子
d.自噬

本文为大家介绍细胞内离子的产品:

离子通道为药物的研发提供了重要机遇,可以靶向各种治疗领域,包括神经、心血管和肺部疾病、疼痛及炎症。要解决各种目标细胞背景中最复杂的离子通道靶点,研究人员需要能满足其研究要求的各类优化的分析。Life Technologies基于细胞的离子通道分析产品系列具有灵敏、易用和分析灵活等优点。

1.钾离子通道检测

图1 FluxOR™检测原理。在静息细胞中,加载了FluxOR™染料的本底荧光很低(左),直到钾离子通道被激活。当铊(Tl)随着刺激物一起加入时,可激活染料(右)。
货号 产品名称 应用 规格
HH-F10016 FluxOR™ Potassium Ion Channel Assay HCS;IF 10 microplates
HH-F10017 FluxOR™ Potassium Ion Channel Assay HCS;IF 100 microplates
HH-B10332 BacMam Kv1.3 Ion Channel Reagents 1 kit
HH-B10333 BacMam Kv2.1 Ion Channel Reagents 1 kit
HH-B10334 BacMam Kir1.1 Ion Channel Reagents 1 kit
HH-B10019 BacMam-hERG Potassium Channel Kit 1 kit

2.钙离子通道检测

钙离子指示剂在与钙离子结合后,可使荧光强度增强。Fluo-3是目前最常用的一种钙离子荧光指示剂,可用于荧光显微镜、高通量检测等。Fluo-3 AM是Fluo-3的一种乙酰甲酯衍生物,通过培养,能够轻易进入细胞中,被细胞内的酯酶剪切形成Fluo-3,从而被滞留在细胞内。Fluo-4 是Fluo-3的类似物,但比Fluo-3更明亮、光稳定性更好。Fluo-5F、Fluo-5N和 fluo-4FF是Fluo-4的类似物,具有较低的钙离子结合力,适合于检测1 μM – 1mM的胞内钙离子水平,在这个浓度范围内,Fluo-3和Fluo-4与钙离子的结合通常已经饱和。此外,Life Technologies的Fluo-4 Direct™ Calcium Assay Kit可抑制培养基产生的背景荧光,而对细胞荧光几乎没有影响。可使用含血清的培养基,无需去除血清。

图2光滑爪蟾卵母细胞注射三磷酸肌醇的非水解类似物后,以Fluo-3作为钙离子指示剂的螺旋状钙流的激光共聚焦成像图片。 图3 对muscarnic 1 (M1)受体拮抗剂剂量依赖的钙应答。CHO M1细胞种于多聚赖氨酸包被的384孔板中培养过夜。次日细胞经carbachol、MCN-A-343、ethanechol、oxotremorine和pilocarpine刺激后,使用Fluo-4 Direct™Calcium Assay Kit测定钙应答。相对荧光强度为最大应答减去最小应答后,除以最小应答。
货号 产品名称 应用 Ex/Em 规格
HH-F1240 Fluo-3, Pentaammonium Salt, cell impermeant HCS;IF;M 506/526 1 mg
HH-F1241 Fluo-3, AM, Calcium Indicator HCS;IF;M 506/526 1 mg
HH-F1242 Fluo-3, AM, Calcium Indicator HCS;IF;M 506/526 20x50 µg
HH-F14218 Fluo-3, AM, cell permeant HCS;IF;M 506/526 1 ml
HH-F14242 Fluo-3, AM, Calcium Indicator HCS;IF;M 506/526 40x1 mg
HH-F23915 Fluo-3, AM, FluoroPure™ grade HCS;IF;M 506/526 10x50 µg
HH-F14201 Fluo-4, AM, cell permeant HCS;IF;M 488/530 10x50 µg
HH-F14202 Fluo-4 AM - Packaged For High-Throughput Screening HCS;IF;M 488/530 5x1 mg
HH-F14217 Fluo-4, AM, cell permeant HCS;IF;M 488/530 500 µl
HH-F23917 Fluo-4, AM, FluoroPure™ grade - Special Packaging HCS;IF;M 488/530 10x50 µg
HH-F36205 Fluo-4 NW Calcium Assay Kit M 488/530 100 microplates
HH-F36206 Fluo-4 NW Calcium Assay Kit M 488/530 10 microplates
HH-P10020 PowerLoad™ Concentrate, 100X HCS;IF;M 488/530 5 ml
HH-F10471 Fluo-4 Direct™ Calcium Assay Kit HCS;IF;M 488/530 10×10 ml
HH-F10472 Fluo-4 Direct™ Calcium Assay Kit HCS;IF;M 488/530 1 ×100 ml

3.氯离子通道检测:

氯离子通道参与多种重要的生理功能,包括跨上皮的离子转运、细胞电兴奋性和离子稳态。氯离子通道功能受损会引起很多慢性疾病,因此它们也是药物靶标。为了方便测定氯离子通道活性,Life Technologies开发了荧光蛋白的生物传感器Premo™ Halide Sensor。

特点:? 氯离子通道特异性:以电压和配体设门的氯离子通道和转运子进行功能检测。? 快速:高通量测定氯离子流,重复性高? 信号强:高表达,无需洗涤? 方便:通过BacMam技术即可将Premo™ Halide Sensor有效无毒性地转入细胞
货号 产品名称 应用 Ex/Em 规格
HH-P10229 Premo™ Halide Sensor IF 515/530 1 kit

4.膜电位

电压敏感探针(VSPs)是基于荧光共振能量转移(FRET)的电压感应检测技术,用于测定细胞膜电位的变化。

特点:

? 高通量:一天可检测32000个样本

? 灵敏度高:精确地检测到1%的Emission Ratio per mV变化

? 快速检测应答:次秒响应时间

? 比率计读数:减少孔与孔之间、染料加载、温度波动等引起的实验误差

? 应用广泛:可用于检测任何可改变膜电位的靶标

货号 产品名称 规格
HH-K1016 Voltage Sensor Probes Set, DiSBAC2(3) and CC2-DMPE 1 mg
HH-K1046 Voltage Sensor Probes Set, DiSBAC4(3) and CC2-DMPE 1 mg
HH-K1019 VABSC-1 Dye (Voltage Assay Background Suppression Compound) 1 g
HH-K1017 CC2-DMPE (voltage sensor probe) 1 mg
HH-K1070 CC2-DMPE (voltage sensor probe) 10 mg
HH-K1018 DiSBAC2(3) 1 mg
HH-K1021 DiSBAC2(3) 5 mg
HH-K1047 DiSBAC4(3) 1 mg
HH-K1022 DiSBAC4(3) 5 mg