eBioscience 最新改良一步法

核酸类似物BrdU，掺入到新合成的DNA中，通过BrdU的免疫染色检测细胞增殖。

优势：

⇒ 适用于各种种属

⇒ 效果稳定分群清晰

⇒ 一步破膜，一种缓冲液，比市场上现有试剂盒节省40分钟~1个半小时的处理时间

⇒ 固定破膜步骤可以兼容 转录因子分析（如Mouse Foxp3/EOMES）细胞因子分析（如Mouse IFNgamma）

⇒ 有可停留步骤，方便灵活安排实验

⇒ 是市场上标记最多的产品，四种标记可供选择——FITC/APC/eFlour450/PerCP-eFlour 710

⇒ 100T包装，单次检测成本低，即将推出25T包装

经CD3/CD28刺激的小鼠脾细胞，未标记（左图）或标记（右图）BrdU后的结果

试剂盒组分：

BrdU (cat. 00-4440-51A): 5 x 1 mL vial;

DNase I (cat. 00-4425-60A): 10 x 1000 U vial;

荧光标记BrdU 抗体 (cat. 11-5071-42): 1 x 100 test vial;

BrdU 染色浓缩液 (4X) (cat. 00-5515-43): 1 x 30 mL bottle;

固定破膜稀释液 (cat. 00-5223-56): 1 x 100 mL bottle;

推荐protocol：

1、 用BrdU标记细胞；

2、 表面染色（可选，可在后面与BrdU同时染色，节省时间）

3、 用染色缓冲液固定破膜，室温15分钟?

4、 DNase I处理，37℃ 1小时

5、 BrdU抗体孵育（或加其他表面及胞内抗体一起孵育），4℃ 20-30分钟

6、 上机分析 可以停留最长16小时

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