流式胞内染色步骤

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使用FIX & PERM固定破膜剂

  1. 制备好细胞悬液,取100ul(全血样本:人100ul,小鼠30~50ul)染表面抗体,室温避光孵育15min,不用洗涤
  2. 加入100ul FIX&PERM MEDIUM A,室温孵育15min
  3. 加入3ml流式染色缓冲液(Flow Cytometry Staining Buffer)300g离心5min,弃上清,涡旋振荡,使残留液体混匀沉淀
  4. 加入100ul FIX&PERM MEDIUM B和胞内抗体(和/或相应的同型对照),室温避光孵育15min
  5. 加入3ml流式染色缓冲液,300g离心5min,弃上清收集细胞
  6. 用 500ul 流式染色缓冲液重悬细胞,上机检测并分析。如不能立即检测,用0.5ml 0.1~4%多聚甲醛重悬4℃避光保存24小时内上机分析

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