现货供应：Dylight系列荧光二抗

图1：Dylight荧光标记二抗的激发（左）和发射（右）光谱

表1：Dylight荧光标记二抗的最大激发和发射波长
一、Dylight绿色光染料
DyLight 488-标记的抗体，其最大吸收在493 nm，最大发射为518 nm。亮度比Cy2和FITC亮，与Alexa 488相当，但背景较低。（见图2、图3）

图2： HEp-2细胞，检测系统为ANA一抗(Bio-Rad) 和不同荧光标记的二抗。 上排使用的抗淬灭封片剂为ProLong Gold (Invitrogen)，下排是用含 n-propyl gallate(Fluka)的PBS-90% 甘油封片。 Nikon LABOPHOT荧光显微镜观察，光下暴露1秒后 选取最亮的部分用Nikon D-70 DSLR相机放大100X拍照。

DyLight 488标记的抗体相比FITC 和Cy2 抗体，在不加抗淬灭剂的情况下，光稳定性更强（见图4）。抗淬灭剂不会增加其光稳定性（见图5）。
二、DyLight红色光染料
DyLight 549-标记的抗体，其最大吸收在555 nm，最大发射为568 nm（见图1、表1）。亮度比TRITC亮，与Cy3和Alexa Fluor 555相当，但背景较低。（见图6）

图5：HEp-2细胞，检测系统为ANA一抗(Bio-Rad) 和不同荧光标记的二抗。上排使用的抗淬灭封片剂为ProLong Gold (Invitrogen)，下排是用Vectashield (Vector Labs) 封片。Nikon LABOPHOT荧光显微镜观察，光下暴露1秒后选取最亮的部分用Nikon D-70 DSLR相机放大100X拍照。在不加抗淬灭剂，只用PBS-90%甘油封片的情况下，DyLight 549 与Alexa 555相比的光稳定性相当，比Cy3稍强（见图7）。抗淬灭剂可以增加这三种荧光二抗的光稳定性（见图8）。
三、DyLight深红色光染料：
图8： HEp-2细胞，检测系统为ANA一抗(Bio-Rad) 和不同荧光标记的二抗。使用的抗淬灭封片剂为ProLong Gold (Invitrogen)。Nikon LABOPHOT荧光显微镜观察，Texas Red二抗光下暴露2秒，Alexa 和DyLight二抗光下暴露1秒后选取最亮的部分用Nikon D-70 DSLR相机放大100X拍照。DyLight 594-标记的抗体，其最大吸收在591 nm，最大发射为616 nm。比Alexa 594明显要亮，亮度和水溶性都比Texas Red好很多。（见图9）

ProLong Gold封片时，DyLight 594与Alexa 594相比光稳定性相当，比强（见图10，左）。Vectashield封片时，DyLight 594和 Alexa 594的光稳定性都比Texas Red弱（见图10，中）。含 n-propyl gallate的PBS-甘油封片时，DyLight 594的光稳定性最强（见图10，右）。图9：随时间变化的荧光强度曲线，检测细胞：HEp-2，检测系统：ANA (Bio-Rad)一抗和不同荧光标记的goat anti-human IgG (H+L)，从左到右分别用ProLong (Invitrogen)、Vectashield (Vector Labs)和 含n-propyl gallate (Fluka) 的PBS-甘油封片。
四、DyLight远红外光染料：
DyLight 649-标记的抗体，其最大吸收在652 nm，最大发射为670 nm。亮度比Cy5和Alexa 647亮，背景比Alexa 647低（见图12）。

图10：人空肠邻近部位的切片，检测系统：anti-PGP一抗和 DyLight 649 (red)二抗（左）、Cy5 (red)二抗（右）。 DyLight 649的染色更强. 图片来自于明尼苏达大学的Dr. Gwen Crabb和Dr. William R. Kennedy。

图11：不同的荧光标记二抗检测人外周血淋巴细胞CD3表达，数据为FACS Caliber 流式细胞仪 (Becton Dickinson) 采集并分析。DyLight 649 (绿色)-, APC (黄色)-, Cy5 (蓝色)-抗体来自Jackson ImmunoResearch，Alexa 647（红色）抗体来自Molecular Probes, Inc. 箭头部分表明Alexa 647二抗有一些背景染色

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Dylight系列荧光二抗产品列表：