联科生物细胞周期试剂盒Cell cycle staining Kit中文操作步骤

试剂盒特点

1. 独创的活细胞一步法检测，收集——洗涤——染色，简单快速
2. 兼容固定细胞检测，改进的固定方法，更少细胞粘连，更小CV值
3. 兼容流式和荧光显微镜分析，提供详细protocol

固定细胞处理

1. 收集细胞悬液，细胞数为2 × 10⁵ ~ 1 × 10⁶。离心沉淀细胞，去上清，轻敲试管，用剩余液体重悬沉淀；加入室温的PBS1ml。
2. 将所有的细胞缓慢滴入3ml的冰乙醇（-20℃）中，边滴边高速涡旋振荡。该细胞放在-20℃可保存几个月。
3. 离心沉淀细胞，弃去乙醇，轻敲试管使沉淀松散，加入室温PBS 2~5ml，静置15min使细胞再水合。离心弃上清。
4. 加入1 mL的试剂A，涡旋混匀5~10s。室温孵育30min。

活细胞处理

1. 收集细胞悬液，细胞数为2 × 10⁵ ~ 1 × 10⁶。离心沉淀细胞，去上清。用PBS洗一次，弃上清。
2. 加入1 mL的试剂A和10μL 的试剂B，涡旋混匀5~10s。室温孵育30min。

流式分析

孵育完的细胞悬液直接上机。

荧光显微镜分析

1. 孵育完的细胞悬液离心去上清，在新鲜的缓冲液（如PBS）中重悬细胞。
2. 加细胞悬液滴于玻片，盖上盖玻片，用合适的滤片观察。