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在体外培养黏附细胞时，常常需要消化分离细胞，消化分离的细胞后续进行细胞转染实验、细胞迁徙实验、细胞增殖实验、及分析检测（如流式细胞术），对于上述实验，大家通常使用蛋白酶进行消化分离细胞，然而这些酶（如胰酶）对细胞损伤比较厉害，而Accutase 是一种天然的酶，兼具蛋白水解酶和胶原酶的活性。但它比胰酶和胶原酶更有效，使用浓度更低，使之毒性更小、更温和，因此对细胞的损伤更小，可减少因消化处理带来的假阳性。即便长时间消化，也可保持 90%以上的细胞活力。
- 无需进行中止反应
- 数分钟内分离黏连细胞
- 温和的分离细胞，可以获得最大的细胞活力
- 最高的铺板效率
- 不含哺乳动物与细菌来源的成分
- 可保护抗原决定簇
图1.细胞消化。Accutase酶处理人MG63纤维肉瘤细胞，细胞快速脱落，消化为单个细胞，且具有高活力。即使处理45min后，细胞活力仍达到97±3%。
图2.消化前后的比较。Accutase处理前，细胞呈单层贴壁(左图)；Accutase酶处理后，显微镜下观察不到细胞，说明消化得很彻底。
已在以下细胞中得到验证：
hESCs、fibroblasts、keratinocytes、vascular endothelial cells、hepatocytes、vascular smooth muscle cells、hepatocyte progenitors、primary chick embryo neuronal cells、bone marrow stem cells、adherent CHO and BHK cells、macrophages、293 cells、L92 cells、immortalized mouse testicular germ cells、3T3、Vero、COS、HeLa、NT2、MG63、M24 and A375 metastatic melanoma、gliomas U251 and D54、HT1080 fibrosarcoma cells 和 Sf9 insect cells 等。
即使您的细胞不在列举之列，不妨也可以尝试一下
操作过程
1.在4℃或室温融解Accutase。
2.用无菌PBS洗板或瓶。
3.加入Accutase溶液，表面区域75 cm2时加入10mL Accutase溶液，按比例加入。
4. 室温消化5-10分钟。
5.进行后续操作，无需加入任何酶抑制剂。
以下是我们实际测试的结果
联科生物凋亡试剂盒自带Accutase酶相关产品
应用范围：
Accutase酶在分离细胞方面具有独特优势，主要应用于：细胞表面标记分析，病毒扩增试验，血清缺乏细胞休眠分析，转染致癌基因变态分析，神经嵴细胞迁移分析，细胞增殖分析，细胞结合位点分析，肿瘤细胞迁移分析，细胞通道常规分析，产物扩增（生物反应器）和流式细胞技术。
